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文档内容摘要
ppt 风湿免疫系统的临床常用实验室诊断技术,,1 一般实验室检查,血常规 尿常规 血沉 C反应蛋白 免疫球蛋白+补体 抗O+类风湿因子 尿酸,1.1.1 RA常见血常规变化,贫血:主要为慢性病贫血(约3/4) 白细胞减少:多见于服用环磷酰胺(CTX)、硫唑嘌呤(AZP)、金制剂等药物后。 血小板的变化:RA患者血小板常增高,其程度与患者关节炎症及血浆中存在某些急性相蛋白有关。 Felty综合征:多发生于长期类风湿因子阳性、有关节畸形的患者,其特点为脾肿大和中性粒细胞减少。,1.1.2 SLE常见血常规变化,贫血:包括慢性病贫血、缺铁性贫血、自身免疫性溶血性贫血、骨髓增生低下性贫血、失血性贫血、脾亢引起的贫血和肾性贫血等。 白细胞变化:可有中性粒细胞减少或淋巴细胞减少或二者均减少。原因:骨髓抑制、脾亢、药物作用。 血小板减少:尤其易见于抗心磷脂抗体阳性患者。 血栓形成:约半数出现于抗狼疮凝集物阳性患者。,1.1.3 其它风湿病血常规变化,抗磷脂抗体综合征:血小板减少; 干燥综合征:约21%可有轻度正常细胞性贫血,少数可有白细胞减低及血小板减少。 血管炎:反应急性期炎症时可出现贫血、白细胞增多或血小板增多;97%变应性肉芽肿性血管炎患者嗜酸性粒细胞增多,激素治疗后可恢复。,1.2常见风湿病患者尿常规变化,SLE患者可出现血尿、蛋白尿和管型尿等 干燥综合征患者可出现肾性糖尿、氨基酸尿或蛋白尿,亦可因肾小管酸中毒出现反常性碱性尿 类风湿关节炎、硬皮病及小血管炎亦常出现肾脏损害,1.3 血尿酸,有助于诊断痛风性关节炎 对已确诊的患者,追踪检查血和尿尿酸水平则有助于判断药物治疗效果。,2 风湿病专科检查,临床免疫学检查 骨与关节的影像学检查包括关节MRI、血管MRI、关节CT检查、血管造影、骨扫描等; 遗传学检查:HLA-B27 病理检查:肾活检(免疫组织化学)、皮肤狼疮带、唇腺活检、血管活检、淋巴结活检等; 关节镜检查; 其他:骨密度、角膜荧光染色、泪膜破裂试验、Schirmer’s试验、唾液流量、关节液检查等。,2.1 临床免疫学检查,包括抗核抗体谱、抗ds-DNA抗体、抗ENA抗体、抗中性粒细胞胞浆抗体、抗血小板抗体、抗心磷脂抗体、类风湿因子、抗核周因子、抗角蛋白抗体、抗线粒体抗体、抗平滑肌抗体、补体、T淋巴细胞亚群等;,2.1.1常见风湿病患者免疫球蛋白及补体变化,SS患者免疫球蛋白均可增高,主要为IgG,其水平与病情活动相关; SLE患者常出现补体降低,以C4为主,其水平与病情活动性相关,2.1.2 RF的意义,作为类风湿关节炎(RA)的筛选试验有一定的价值,至少75%的患者RF(+)。 美国风湿病学会(ACR)RA诊断标准:RF (+) 是7条之一。 对于RA而言并不具特异性。 (-)并不能除外RA,而(+)也不能因此确诊。 其滴度可随病情变化而改变与疾病预后相关,其它类风湿因子阳性情况,正常人及部分60岁以上老年人,但滴度不高 其它风湿病:SLE、干燥综合征及硬皮病等 急性病毒感染、流感、肝炎、单核细胞增多症以及免疫(疫苗)注射 寄生虫感染、如疟疾及丝虫病等 慢性炎性疾病:如结核病、麻风、雅司、梅毒及亚急性细菌性心内膜炎等 肿瘤,尤其在放疗与化疗后更明显 其它高免疫球蛋白血症状态:如冷球蛋白血症、慢性肺部或肝脏疾病、高丙种球蛋白血症性紫癜等。,抗核抗体 抗DNA抗体 抗核糖体P抗体 抗组蛋白抗体 抗ENA抗体 抗Sm抗体 抗U1RNP抗体 抗Ro/抗SSA抗体 抗La/抗SSB抗体 肌炎特异性抗体(MSA) 抗合成酶抗体 抗SRP抗体 抗Mi2抗体 与系统性硬化相关的抗体 抗拓扑异构酶1抗体 抗着丝点抗体(动粒) 抗核仁抗原的抗体,抗中性粒细胞胞质抗体 C-ANCA P-ANCA 抗磷脂抗体 狼疮抗凝物 抗心磷脂抗体 β2糖蛋白 抗Ku抗体 抗内皮细胞抗体 抗角化上皮抗体 抗核周因子抗体 抗CCP抗体,风湿科疾病常见自身抗体,2.1.3,RF分型,分IgG、IgM和IgA三型 IgG-RF常见于有类风湿结节、类风湿血管炎及高滴度IgM RF的RA患者,在正常人以及非RA疾病患者难以检测出。 IgM-RF明显升高者与RA病情活动及类风湿血管炎相关。 IgA-RF可见于10%的RA患者,常见于高低度的IgM-RF患者,其水平和RA关节炎严重程度、骨质破坏、粘膜外分泌腺症状强相关。,抗 RA33,1989 年 Hassfeld 发现,诊断RA敏感性25%-40%,特异性90%左右,有助于R早期诊断,与患者年龄、性别、病程、病情活动及药物治疗均无关。,抗环瓜酸肽抗体(抗CCP抗体),2000年Schellekens人工合成环瓜氨酸肽用于检测RA (Arthritis Rheum, 2000; 43: 155) 诊断RA敏感性68%,特异性98%,可出现于RA早期,是诊断早期RA的良好指标之一,阳性者出现侵袭性关节炎的概率远大于阴性者。 在青少年特发性关节炎(JIA)中的检出率(2%)明显低于成人RA,且与病情活动、关节破坏无相关,对JIA诊断及病情评估无意义。,ANCA: MP0&PR3,ANCA:抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody),以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原,阳性荧光染色模型可分为胞质型(cANCA)和核周型(pANCA)。 pANCA的靶抗原主要为MPO(髓过氧化物酶,myeloperoxidase);cANCA的靶抗原主要为PR3(蛋白酶3,proteinase 3)。,MP0,主要与MPA、NCGN、过敏性肉芽肿性血管炎(Charg-Staus syndome, CSS)相关。 尚可见于PAN、抗肾小球基底膜疾病、WG、SLE、RA、DIL和Felty综合征等疾病。 阳性与病情活动相关,可用于判断疗效、估计复发和指导治疗。 与RA的关节外损害及血管损害有相关性。,PR3,与WG密切相关,诊断WG的特异性大于90%,加上MPO则其特异性大于95%。 抗体效价与病情活动一致,可用于判断疗效、指导治疗。 偶见于显微镜下多血管炎(microscopic polyangitis, MPA)、坏死性新月体肾小球肾炎(necrotizing and crescentic glomeralonephritis, NCGN)、结节性多动脉炎(polyateritis nodosa, PAN)等其它原发性血管炎中。,GBM,GBM抗体是抗基底膜抗体型肾小球肾炎特异性抗体。 出现于Goodpasture综合征、急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎患者,患者可伴有或不伴有肺出血。 抗肾小管基底膜自身抗体也可见于药物诱导的间质性肾炎,但它在发病中的作用不明。GBM抗体阳性的患者约50%病变局限于肾脏,另50%有肾脏和肺部病变。仅有肺部病变的抗GBM抗体阳性者非常少见。 检测Goodpasture综合征患者血清中自身抗体对诊断和治疗均非常重要。约15%左右患者有GBM抗体,但绝大多数有ANCA。 抗体检测有助于判断预后,GBM抗体阳性者预后最差,其次是PR3相关性韦格纳肉芽肿和MPO相关性显微镜下多血管炎。,抗核抗体 (Antinuclear Antibody, ANA),ANA,采用间接免疫荧光法(IIF)进行测定。 已成为系统性红斑狼疮(SLE)的标准筛选试验。 ACR提出了11条SLE的诊断标准,ANA(+)为其中之一。 95%的SLE患者ANA(+)。,ANA,试验中(+)结果的出现率取决于以下因素: 分析系统 区分血清(+)与(-)的选定的滴度值 技术人员的水平 与疾病的活动度并不相关。 滴度本身并没有评价预后的意义。 ANA(+)可出现在多种情况下。,ANA(+)的原因,风湿性疾病 SLE 多发性肌炎 干燥综合征 硬皮病 血管炎 RA 正常的健康人 女性>男性,出现率随年龄而增加 风湿性疾病患者亲属 孕妇,药物诱导 肝脏疾病 肺部疾病 慢性感染 血液系统异常 恶性肿瘤,SLE患者使用IIF法测定ANA 呈(-)的一些解释,技术方面 临床方面 未生成ANA。 经皮质激素或免疫抑制剂治疗。 终末期肾病。 隐蔽的ANA:与循环中免疫复合物结合,沉积于组织。 由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。,ANA的 荧光类型,ANA试验的结果中一般会报告其分型,这些分型可能与某一特定的抗原反应活性相关。,核仁型(nucleolar),均质性 ( homogeneous ),周边型(rim ,核膜型membranous),斑点型(speckled),抗dsDNA抗体,主要见于SLE,是目前公认的SLE高度特异性抗体,被列为诊断标准之一;未治疗的SLE患者中,抗dsDNA抗体的诊断特异性为90%,敏感性为70%; 70%的系统性红斑狼疮患者在其疾病的某些阶段都会出现抗dsDNA抗体; 在具有抗dsDNA抗体的人中,有85%会在约5年内发展成SLE; 抗体效价与疾病活动度相关; 干燥综合征、药物性狼疮、混合性结缔组织病等其他CTD患者也可出现抗dsDNA抗体阳性,但阳性率一般低于10%,抗体效价也低;在自身免疫性肝炎(AIH)中也可出现抗dsDNA抗体,常出现于ANA阳性的I型AIH患者中,对疾病可能具有预后价值。,抗核小体抗体,Nucleosome:核小体,真核细胞染色质基本重复结构的亚单位。 抗核小体抗体在SLE诊断中的敏感性为58%-71%,特异性可达97%-99%;与SLE疾病活动性及狼疮肾炎的发生明显相关。 抗核小体抗体多见于活动性狼疮特别是狼疮肾炎患者,与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体等SLE的其他特异性抗体同时检测,可明显提高SLE临床诊断的敏感性和特异性。,抗Sm抗体,以首例发现的病人名(Smith)命名。 对SLE的诊断具有较高特异性,是目前公认的SLE的血清标志抗体,被列入SLE诊断标准,在SLE中的阳性率为20%-40%,对早期、不典型SLE或经治疗缓解后的SLE回顾性诊断有重要意义,其阴性不能排除SLE诊断。,P0,抗核糖体P0抗体主要见于SLE; 常在SLE活动期中存在; 阳性率在10%-40%左右,是诊断SLE的特异性抗体。 抗核糖体抗体阳性的患者中枢神经系统病变发生率较高,抗组蛋白抗体 (Anti-Histone Antibody,AHA),又称组蛋白反应性抗核抗体(histone reaction antinuclear antibodies, HRANA),可出现于多种结缔组织病中,不具有诊断特异性。 在药物性狼疮(Drug Induced Lupus, DIL)的患者中出现率90%。 常见可诱发DIL的药物为:普鲁卡因酰胺、苯妥英钠、异烟肼、肼苯哒嗪、奎尼丁、替尼酸、青霉胺、氯丙嗪及雌激素等。 其它阳性见于:SLE (30%-80%)、RA (15%-75%)、JRA (30%-75%)、PBC (40%-60%)、SSc (30)、Felty综合征(80%)、pSS (10%)、MCTD (10%)等。 尚可出现于HIV感染、原发性肾小球肾炎、膜性肾病、自发性肾病综合征及早老性痴呆等。,抗U1snRNP抗体,混合性结缔组织病(MCTD)高低度阳性。 25%-30%的SLE患者存在该抗体,一般与抗Sm抗体一同出现。 也出现于干燥综合征、RA、硬皮病和多发性肌炎的患者中。,抗SSA/Ro60抗体&抗SSA/Ro52抗体,抗SSA抗体,又称抗Ro抗体、抗干燥综合征抗原A抗体,其靶抗原中最重要的是52kD和60kD两种蛋白。 主要见于原发性SS(40%-95%),也可见于SLE (20%-60%)、RA (3%-10%)、SSc (24%)、PBC (20%)及PM等,偶见于慢性活动性肝炎(CAH)。 抗SSA/Ro60抗体&抗SSA/Ro52抗体均可见于SS及SLE。 单独出现抗SSA/Ro52抗体更多见于SS中,而单独的抗SSA/Ro60抗体更多见于SLE,尤其是SCLE(subacute cutaneous lupus erythematosus亚急性皮肤型红斑狼疮).,抗SSB/La抗体,抗SSB抗体又称抗La抗体、抗干燥综合征抗原B抗体和抗Ha抗体。 对诊断SS具有高度特异性,是SS的血清特异性抗体,在pSS中的阳性率为(65%-85%)。 常与抗SSA抗体同时出现,较抗SSA抗体更为特异。 仅出现于少数SLE患者(10%-15%)。 在其它自身免疫病中出现,常提示该患者同时存在即发现干燥综合征。 抗SSA抗体和抗SSB抗体尚可作为SS的预后参考,常与血管炎、淋巴结肿大、紫癜、高丙种球蛋白血症、严重的唾液腺功能障碍、腮腺肿胀、高效价的类风湿因子、白细胞减少症、光过敏和皮损等临床症状相关。,抗SCL-70抗体,又称抗拓扑异构酶1抗体,被视为硬皮病血清特异性抗体。 存在于25%的系统性硬化症患者中,其中重型弥漫型阳性率为75%、CREST综合征者为13%、PM/SSc重叠综合征者为12%,局限型硬皮病患者此抗体一般为阴性。 主要见于患有弥漫型硬皮病以及存在系统性损害(特别是心脏与肺)的患者。 与现在患有癌症或将来发生癌症显著相关。 是孤立性原发性高血压的“保护”因素。,抗着丝点抗体 (anticentromere antibodies,ACA),存在于22%-36%的系统性硬化症患者血清中,与雷诺征密切相关。 是CREST综合征的特异性抗体。 也见于患有原发性雷诺征患者(25%)。 弥漫型硬皮病中较为少见(仅8%),很少与抗Scl-70抗体同时存在。 偶见于SLE、RA、SS等其它CTD(5%)、关节痛和原发性甲状腺炎伴雷诺征等患者中;尚见于原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者(10%-20%)。 CREST (Calcinosis,Raynaud’s phenomenon, Esophageal dysmotility, Sclerodactyly, Telangiectasia)综合征:钙质沉着、雷诺现象、食道功能障碍、指端硬化和毛细血管扩张。,Jo-1抗体,为最常见的抗合成酶抗体,是PM/DM特异性自身抗体(特异性为95%),在PM/DM中阳性率为20%-30%,且多数患者伴有间质性肺疾病(ILD)和多关节炎或关节痛。 合并ILD的PM/DM患者中,抗Jo-1抗体的阳性率高达60%。 抗体效价与疾病的活动性相关,与患者肌酸激酶水平及肌炎活动的临床指标相关。 临床上常将临床表现为急性发热、对称性关节炎、“技工手”